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参考资料与来源
这里汇总本站主要实验建议所依据的厂商协议、方法学文章和报告规范，可直接打开原始来源查看。
来源优先级
具体样本、裂解/定量试剂、抗体、凝胶、膜和设备的产品专属说明书优先级最高；其次是同一厂商的通用技术协议；再其次是同行评审的方法学与报告规范。通用网页中的建议不能覆盖具体产品已经验证的使用条件。
Thermo Fisher Scientific — Blocking Buffers for Western Blot and ELISA
介绍封闭剂选择与抗体、检测体系之间的关系，包括 milk/BSA 的差异，以及磷酸化蛋白和 avidin/biotin 检测中的兼容性问题。
打开原始来源 →Cell Signaling Technology — Where to Find the Recommended Primary-Antibody Dilution Buffer
说明 milk 或 BSA 应按具体一抗产品页或抗体专属说明选择，而不是使用跨抗体的固定规则。
打开原始来源 →Cell Signaling Technology — Phospho-p53 (Ser15) Blocking/Diluent Example
一个具体的 phospho 抗体案例：该抗体验证条件使用 milk，而 BSA 会产生更高背景，说明磷酸化状态本身不足以决定封闭剂。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Quantitative Western Blot Analysis
介绍样本量、抗体用量、饱和、背景和检测线性对定量 Western Blot 的影响。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — RIPA Lysis and Extraction Buffer
该 RIPA 产品的配方与使用资料，包括提取范围、实际组成、抑制剂需求和下游兼容性。
打开原始来源 →Cell Signaling Technology — Preparing Tissue Extracts for Western Blot
提供一套组织低温处理、机械匀浆、超声和澄清的厂商实例；其中样本量和设备程序仅适用于相应体系，不作为跨设备通用参数。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Protein Assays & Quantitation Troubleshooting
说明去污剂、还原剂、螯合剂等样本基质成分对不同蛋白定量方法的干扰和兼容范围。
打开原始来源 →LI-COR — Determine the Combined Linear Range for Target and Internal Loading Control
给出通过上样梯度寻找目标蛋白与内参共同可用线性范围的定量流程。
打开原始来源 →Bio-Rad — Total Protein Normalization
介绍定量 Western Blot 中信号与蛋白量的比例关系、成像线性范围、housekeeping protein 的局限，以及总蛋白归一化。
打开原始来源 →Bio-Rad — Performing Protein Electrophoresis
介绍 SDS-PAGE 装置、上样和具体系统的运行条件，并说明功率、发热、缓冲液和样品化学导致的常见泳道变形。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Overview of Electrophoresis
概述 SDS-PAGE、不连续缓冲体系、聚丙烯酰胺孔径效应，以及固定浓度胶和梯度胶的原理。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Protein Gel 1D Electrophoresis Troubleshooting
汇总拖尾、泳道变形、上样过量、盐、散热和凝胶分离范围等常见电泳问题。
打开原始来源 →Laemmli (1970) — Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4
Laemmli 不连续 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳体系的经典方法学来源。
打开原始来源 →Bio-Rad — Separating Proteins to a Blotting Membrane
介绍转膜方向、湿转与半干转的适用情况、膜预处理、气泡、分子量影响和可逆总蛋白染色。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Western Blotting Support: Troubleshooting
提供大分子胶内滞留、小分子穿膜、膜孔径、methanol/SDS 调整和异常电流等转膜问题的排查建议。
打开原始来源 →Towbin, Staehelin & Gordon (1979) — Electrophoretic transfer of proteins from polyacrylamide gels to nitrocellulose sheets
从聚丙烯酰胺凝胶向硝酸纤维素膜电泳转移蛋白的经典方法学论文。
打开原始来源 →Cell Signaling Technology — Western Blot Procedure
提供样本制备、转膜、封闭、抗体孵育、洗膜和检测的一套厂商起始流程。
打开原始来源 →Cell Signaling Technology — Western Blot Troubleshooting Guide
按问题汇总样本裂解、黏度、转膜、稀释液、洗膜、高背景、拖尾和小分子蛋白穿膜等故障。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Overview of Western Blotting
概述电泳、转膜、膜材料、封闭、抗体和检测等 Western Blot 基本环节。
打开原始来源 →Thermo Fisher Scientific — Western Blot Protocols and Recipes
提供膜预处理、化学发光流程和常用缓冲液配方。
打开原始来源 →Bio-Rad — Introduction to Western Blotting
按步骤介绍从样本制备、转膜到图像分析的 Western Blot 流程。
打开原始来源 →Bio-Rad — Western Blot Doctor
以膜图异常模式组织 Western Blot 排错，可作为本站按现象排查结构的参考。
打开原始来源 →Uhlén et al. — A proposal for validation of antibodies
提出应用特异性的抗体验证框架，包括遗传学、正交、独立抗体、标签蛋白和捕获质谱等策略。
打开原始来源 →A brief guide to good practices in pharmacological experiments: Western blotting
讨论抗体验证、图像完整性、整膜、饱和以及同膜比较等 Western Blot 良好实践。
打开原始来源 →Blind spots on western blots
分析 Western Blot 图像与报告中的常见问题，包括缺少整膜原图和方法信息不完整。
打开原始来源 →LI-COR — Housekeeping protein validation
说明 housekeeping protein 在用于归一化之前，需要先确认其在当前实验条件下稳定。
打开原始来源 →来源维护
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