Western Blot 实验流程
从当前实验步骤进入对应专题。各页分别说明起始条件、需要检查的结果，以及什么情况下应调整方法。
01
样本制备
根据目标所在组分选择提取方法，确认蛋白定量与裂解液兼容，并确定合适的样本输入量。
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02
SDS-PAGE
选择凝胶体系和分离范围，在转膜前检查泳道形态以及目标分子量区域是否分离清楚。
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03
转膜
选择转膜方式和膜，并确认目标分子量区域的蛋白已经离开凝胶且保留在膜上。
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04
封闭与抗体
按具体抗体说明选择封闭液和稀释液，再分别调整一抗、二抗和孵育条件。
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05
检测与定量
计算相对变化前，确认目标和归一化信号均未饱和，并处于可用的响应范围。
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实验结果有问题？
可以直接从膜上的异常现象开始。完整排错页会结合整膜、对照和转膜结果，缩小需要检查的范围。